- 根據(jù)不同組織類型合理選用組織細(xì)胞固定液
- 點(diǎn)擊次數(shù)：2797 更新時間：2015-11-12
- 凡進(jìn)行病理檢驗(yàn)的各種組織都需要進(jìn)行固定，固定可使組織、細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)盡量接近其生活狀態(tài)時的形態(tài)結(jié)構(gòu)和位置。
對不同類型的組織應(yīng)適當(dāng)合理地選擇組織細(xì)胞固定液，特殊病例或特殊物質(zhì)應(yīng)選擇特殊的組織細(xì)胞固定液。有的固定液對于組織有膨脹作用。固定劑是一種化學(xué)試劑，有液體和固體之分，一般使用較多的是液體，而固體固定劑如多聚甲醛，則多用于實(shí)驗(yàn)研究的組織固定。
由于各種固定液對不同的組織有不同的作用，因此許多專家將根據(jù)各種固定液的優(yōu)缺點(diǎn)，配制出許多混合液的方法來，給組織的良好固定起到了非常積極的作用。但是，值得指出的是并非所有的固定液都不是十全十美的，例如，酒精、甲醛、醋酸固定液，對組織固定很好，組織中各物質(zhì)的染色也十分清晰，但對固定脫水盒為銅質(zhì)的組織時，效果就不好，原因是醋酸跟酮可發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生醋酸銅，沉淀于組織中，可造成對抗原的損害，對于免疫組織化學(xué)的顯示，經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明：可呈弱陽性乃至陰性。由此可見，組織細(xì)胞固定液的選擇正確與否決定著對某些病例的免疫組化標(biāo)記的成敗關(guān)鍵。在我們的日常工作科研中，對于組織的固定，應(yīng)有針對性的選擇，方能獲得滿意的效果。
下面給大家介紹幾種常見的組織細(xì)胞固定液。
1、中性緩沖甲醛。該液能夠固定大多數(shù)組織結(jié)構(gòu)，對脂類有較好的固定效果。免疫組化、原位雜交等試驗(yàn)都可以使用。本液還可以長時間存放，是實(shí)驗(yàn)室常備的組織細(xì)胞之一。固定液浸透較慢，固定時間不限，浸透之后可以長時間存放(免疫組化和原位雜交標(biāo)本建議不要這么做)。美中不足是染色時酸性染料著色不佳，并且本液對糖類沒有固定作用。
2、Bouin。過去常用的一種組織細(xì)胞固定液，主要用于軟化皮膚或者富含結(jié)締組織的標(biāo)本，在胚胎標(biāo)本處理中使用很廣。用本液處理后，酸性染料著色鮮艷。但是，由于含有苦味酸，不能用于原位雜交等實(shí)驗(yàn)檢測。此外，本液對很多細(xì)胞器的破壞較大，尤其不適于固定腎臟標(biāo)本。經(jīng)本液固定的標(biāo)本，尺寸應(yīng)盡可能小，否則內(nèi)外固定的效果有所差別。本液可以較長時間存放，但標(biāo)本在其中不應(yīng)久存，固定8 ~ 24 h為宜。
3、AAF。該液由醋酸(A)、酒精(A)和甲醛(F)為主要成分，廣泛用于動植物組織的固定和各種實(shí)驗(yàn)檢測，植物固定則是。固定液滲透均一，速度很快。固定時間一般為4 ~ 24 h。此液處理后，染色結(jié)果細(xì)膩，但酸性染料著色力下降。本液配制后可以短時間放置。
4、Helly，Susa，Zenker。這是三種比較相近的固定液，含有汞鹽和重鉻酸鉀。經(jīng)這類固定液處理，標(biāo)本對酸性和堿性染料均有較好的親和能力。染色處理前需要脫汞和脫碘操作。目前除了幾種傳統(tǒng)染色更鮮艷外，并無其他優(yōu)勢。
5、Zamboni。用于免疫組化和免疫電鏡的組織細(xì)胞固定液。保存細(xì)微結(jié)構(gòu)和抗原特性的固定液之一。固定液浸透速度較慢，要求標(biāo)本不能過大，常用于血管灌注。該液可以長時間存放，標(biāo)本在其中也可以保存較長時間，抗原封閉作用相對較弱。由于含有苦味酸，故不用于原位雜交試驗(yàn)。
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